北京清華長(zhǎng)庚醫(yī)院病理科（作者：高國(guó)強(qiáng)、楊江輝）一份病理報(bào)告就是一份“判決書(shū)”，而且病理診斷不僅可以判定腫瘤的良惡性，以至于腫瘤的原發(fā)灶在哪？腫瘤是否需要切除？切多大范圍？切的干不干凈？是否需要繼續(xù)擴(kuò)大切除等，都要靠病理醫(yī)生的診斷報(bào)告來(lái)決定。惡性腫瘤患者治療過(guò)程中，該如何用藥？需不需要放化療等與預(yù)后密切相關(guān)的治療手段，也要有病理診斷來(lái)決定。那么，為什么如此重要的病理報(bào)告為何總是姍姍來(lái)遲，不是“立等可取”呢？大多數(shù)的病理實(shí)驗(yàn)室就像黑匣子一樣不為患者所知，那我們就從標(biāo)本送檢到診斷報(bào)告來(lái)一探究竟……
一、標(biāo)本的前處理：固定和取材
簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)，固定就是把新鮮標(biāo)本放入10%福爾馬林中浸泡，別看這么簡(jiǎn)單的一步，其作用卻至關(guān)重要，一旦做不好，在后續(xù)過(guò)程無(wú)法彌補(bǔ)。首先，固定能防止組織自溶和腐敗，使細(xì)胞內(nèi)的特殊成分，如一些蛋白質(zhì)等沉淀或凝固，使其定位在細(xì)胞內(nèi)的原有部位，便于后續(xù)觀察；其次組織細(xì)胞內(nèi)的不同物質(zhì)經(jīng)固定后產(chǎn)生不同的折光率，對(duì)染料產(chǎn)生不同的親和力，經(jīng)染色后容易區(qū)別；固定劑還有硬化作用，能夠使組織硬度增加，便于制片。因此，充分的固定是制作良好切片的前提，一般要求固定液量應(yīng)為組織總體積的4-5倍，也可10-20倍。組織取下后應(yīng)立即放入固定液中，大多數(shù)組織應(yīng)固定24小時(shí)。送檢來(lái)的標(biāo)本不一定要全部做成切片觀察，取材就是按照檢查的目的和要求切取適當(dāng)大小的組織塊，以供制片進(jìn)行顯微鏡檢查之用。一般要求大小1.5×1.5×0.2-0.3cm為宜，并詳細(xì)記錄取材過(guò)程，必要時(shí)對(duì)標(biāo)本攝影存檔。
二、標(biāo)本的“化學(xué)加工”：脫水、透明、浸蠟
石蠟包埋法是病理發(fā)展過(guò)程中最經(jīng)典的包埋法，也是目前病理科最常用的包埋法。為了讓石蠟進(jìn)入組織，就需要進(jìn)行脫水和透明。脫水是借某些溶媒置換組織內(nèi)水分的過(guò)程。目前病理科常用梯度酒精來(lái)達(dá)到組織脫水的目的。之后需要一種溶劑既能與乙醇混合，又能溶解石蠟，以使石蠟浸入組織塊，這種溶劑目前病理科常用二甲苯，因其化學(xué)危害較嚴(yán)重，也有用環(huán)保透明劑代替的。在這一過(guò)程中，因水分被溶劑（如二甲苯）取代，其折射指數(shù)接近于組織蛋白的折光指數(shù)，組織塊變得透亮，因此稱之為透明。最后，組織浸入融化的石蠟，就完成了組織“化學(xué)加工”程序。
三、標(biāo)本的“手工加工”：包埋、切片、染色
包埋就是用包埋劑（通常為石蠟）將組織包埋成塊的過(guò)程，只有經(jīng)過(guò)包埋才能使組織達(dá)到一定的硬度和韌度，才有利于切成所需要的厚度。接下來(lái)就到了制片的關(guān)鍵過(guò)程－－切片。切片就是用切片機(jī)制作切片的過(guò)程，切片機(jī)對(duì)于一名病理技術(shù)員來(lái)說(shuō)就像槍支之于戰(zhàn)士，寶劍之于英雄，戰(zhàn)馬之于騎士。切片要求厚薄均勻；平坦；無(wú)褶皺、折疊；無(wú)刀痕、裂隙、顫痕。切好的片子放入攤片機(jī)中，用載玻片撈起，瀝水后放在展片機(jī)（烤片機(jī)）上烘烤，之后就可以進(jìn)行脫蠟染色等處理。蘇木素-伊紅（H-E）染色是病理科最常用的染色方法，染色后組織細(xì)胞核呈藍(lán)色，細(xì)胞質(zhì)呈紅色，便于診斷醫(yī)師觀察組織結(jié)構(gòu)，提供診斷依據(jù)。除此之外，為顯示細(xì)胞內(nèi)外特殊化學(xué)物質(zhì)（如含鐵血黃素、黑色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等），還需要進(jìn)行特殊染色；免疫組織化學(xué)染色利用抗原抗體的特異性結(jié)合原理和特殊的標(biāo)記技術(shù)，可以對(duì)組織和細(xì)胞內(nèi)的特定抗原進(jìn)行定位、定性或半定量檢測(cè)；原位分子雜交（FISH）對(duì)于腫瘤易感基因檢測(cè)、腫瘤的預(yù)后判斷和監(jiān)測(cè)、腫瘤的個(gè)體化和靶向治療等方面應(yīng)用廣泛。染色后的切片用中性樹(shù)膠封固，至此－－切片的制作過(guò)程就結(jié)束了。
四、醫(yī)界的“福爾摩斯”：病理醫(yī)師
每一位年輕醫(yī)生要想成為一名真正的病理醫(yī)生，都需要經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的病理專業(yè)訓(xùn)練，病理醫(yī)師精確診斷能力源于他們?nèi)諒?fù)一日在堆積如山的的病理切片中“摸爬滾打”中練就。要想成為一名“偵破高手”，首先要練就一雙“火眼金睛”，病理醫(yī)師首先接觸到標(biāo)本是在取材過(guò)程，醫(yī)師要對(duì)標(biāo)本外觀、大小、顏色、病變范圍、硬度、病灶數(shù)目等仔細(xì)觀察，在顯微鏡下觀察切片，要分辨出疾病反映在病理切片上的變化，搜羅出擅于偽裝的病變，識(shí)破“障眼法”，讓病變“無(wú)所遁形”；其次，病理醫(yī)師需要了解患者的臨床信息，如性別、年齡、臨床病史、各種檢查結(jié)果、手術(shù)所見(jiàn)等等，要全面了解分析；最后，要善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，不斷學(xué)習(xí)，利用科學(xué)技術(shù)方法（組織化學(xué)、免疫組織化學(xué)、原位雜交技術(shù)等），全面綜合分析判斷。
病理技術(shù)工作十分嚴(yán)謹(jǐn)，需要敬業(yè)、精益、專注、創(chuàng)新等工匠精神。“技術(shù)是病理之母”，病理技術(shù)員需要全心投入、精益求精，不斷錘煉、雕琢自己的技藝，更要追求突破、追求革新，學(xué)習(xí)和創(chuàng)新新技術(shù)。病理醫(yī)生不僅要完全了解自己的領(lǐng)域，而且必須具有豐富的臨床醫(yī)學(xué)背景，掌握不同種類的疾病，專業(yè)要求很高。北京清華長(zhǎng)庚醫(yī)院病理科尹洪芳主任將科室的病理醫(yī)生分專業(yè)、分方向培養(yǎng)，“術(shù)業(yè)專攻”，以培養(yǎng)病理亞專科精準(zhǔn)診斷人才。尹洪芳主任教導(dǎo)我們說(shuō)：“病理檢查一旦技術(shù)上有失誤，標(biāo)本不可復(fù)制，病灶丟失不可彌補(bǔ)。病理診斷是定性診斷，影響到臨床治療，因此，病理科是不能出錯(cuò)的科室！”
一份病理報(bào)告，自標(biāo)本送檢之日起，一般3-5個(gè)工作日發(fā)出診斷報(bào)告，如需進(jìn)一部檢查（如特殊染色、免疫組織化學(xué)、原位雜交等）需適當(dāng)延長(zhǎng)時(shí)日。在此期間，病理技術(shù)人員和病理醫(yī)生需要花費(fèi)時(shí)間做許多的工作，病理人會(huì)不斷革新技術(shù)，以期將來(lái)在保證精準(zhǔn)診斷水平的前提下，盡可能的縮短病理報(bào)告時(shí)間，以造福廣大患者。
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