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研究摘要圖

北京清華長庚醫(yī)院12月22日電（通訊員 李孟達(dá)）脈絡(luò)膜是視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞、視網(wǎng)膜外五層、尤其是黃斑中心凹重要的營養(yǎng)來源。脈絡(luò)膜毛細(xì)血管萎縮是老年性黃斑變性、視網(wǎng)膜色素變性、病理性近視等致盲性眼病的重要病理基礎(chǔ)。然而，目前尚無治療脈絡(luò)膜缺血的有效方法。清華大學(xué)附屬北京清華長庚醫(yī)院眼科胡運(yùn)韜教授團(tuán)隊(duì)與清華大學(xué)醫(yī)學(xué)院干細(xì)胞與再生醫(yī)學(xué)中心那潔副教授團(tuán)隊(duì)合作，研究證實(shí)了干細(xì)胞來源的脈絡(luò)膜內(nèi)皮細(xì)胞移植有望成為治療脈絡(luò)膜缺血的新方法，由此為脈絡(luò)膜缺血相關(guān)疾病的治療打開一個(gè)新窗口，具有極高的臨床應(yīng)用及轉(zhuǎn)化前景。

研究團(tuán)隊(duì)高效分化出人多能干細(xì)胞來源的脈絡(luò)膜內(nèi)皮細(xì)胞（hPSC-CEC）， 證實(shí)其表達(dá)脈絡(luò)膜內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記物：CD31、CA4、RGCC、PV-1；細(xì)胞膜表面具有脈絡(luò)膜內(nèi)皮細(xì)胞特征性有孔結(jié)構(gòu)；并具有內(nèi)皮細(xì)胞特異性生理功能。

圖1.人多能干細(xì)胞來源的脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞。

A. 表達(dá)脈絡(luò)膜內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記物；

B. 細(xì)胞膜表面具有脈絡(luò)膜內(nèi)皮細(xì)胞特征性有孔結(jié)構(gòu)；

C.內(nèi)皮細(xì)胞具有脂滴吞噬功能；

D.內(nèi)皮細(xì)胞具有管腔形成功能。

隨后，研究團(tuán)隊(duì)建立了大鼠脈絡(luò)膜缺血?jiǎng)游锬Ｐ停瑢PSC-CEC移植至脈絡(luò)膜上腔。發(fā)現(xiàn)hPSC-CEC可高效整合至大鼠脈絡(luò)膜血管中，增加脈絡(luò)膜厚度。通過吲哚菁綠（ICG）脈絡(luò)膜血管造影，活體觀察到脈絡(luò)膜缺血區(qū)血管重構(gòu)，實(shí)現(xiàn)脈絡(luò)膜缺血修復(fù)。視網(wǎng)膜電流圖（ERG）證實(shí)hPSC-CEC移植治療后，脈絡(luò)膜缺血大鼠視功能顯著提高（圖2）。

圖2.hPSC-CEC對大鼠脈絡(luò)膜血管的修復(fù)作用。

A.hPSC-CEC在大鼠脈絡(luò)膜缺血區(qū)域可整合入大鼠自身血管、并可實(shí)現(xiàn)血管再生（CD34標(biāo)記大鼠及人的內(nèi)皮細(xì)胞；CD31標(biāo)記人的內(nèi)皮細(xì)胞）;

B.大鼠眼底ICG造影顯示移植后脈絡(luò)膜缺血區(qū)域形成新的血管網(wǎng);

C.細(xì)胞移植后脈絡(luò)膜厚度增加；

D.大鼠視網(wǎng)膜電流圖提示細(xì)胞移植后視網(wǎng)膜功能顯著改善。

此外，將hPSC-CEC與大鼠缺血脈絡(luò)膜體外共培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，hPSC-CEC可響應(yīng)缺血環(huán)境，上調(diào)多個(gè)基因，可能起到調(diào)控內(nèi)皮細(xì)胞遷移、血管生成及保護(hù)、免疫調(diào)節(jié)、視網(wǎng)膜修復(fù)以及抑制病理性脈絡(luò)膜新生血管（CNV）形成等作用，改善脈絡(luò)膜微環(huán)境，促進(jìn)脈絡(luò)膜缺血的修復(fù)（圖3）。

圖3.單細(xì)胞RNA測序（single cell RNA-seq）研究顯示hPSC-CECs在與離體缺血脈絡(luò)膜共培養(yǎng)后上調(diào)血管生成、免疫調(diào)節(jié)和神經(jīng)保護(hù)等基因。

綜上，該研究將人多能干細(xì)胞高效誘導(dǎo)為類脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞，將其移植至脈絡(luò)膜缺血?jiǎng)游锬Ｐ兔}絡(luò)膜上腔，可有效改善脈絡(luò)膜缺血，并提高視功能。      2023年12月，該研究成果以“Human pluripotent stem cells derived endothelial cells repair choroidal ischemia（人多能干細(xì)胞來源的內(nèi)皮細(xì)胞修復(fù)脈絡(luò)膜缺血）”為題，于《Advanced Science》（先進(jìn)科學(xué)雜志）（IF 17.521）上發(fā)表學(xué)科交叉研究論文。

清華大學(xué)附屬北京清華長庚醫(yī)院眼科胡運(yùn)韜教授和清華大學(xué)醫(yī)學(xué)院那潔副教授為共同通訊作者。北京清華長庚醫(yī)院眼科李孟達(dá)主治醫(yī)師、霍思同碩士、清華大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士研究生王佩亮、邱輝為共同第一作者。北京清華長庚醫(yī)院眼科林思勇主任醫(yī)師、郭立斌副主任醫(yī)師、李晨迪博士、紀(jì)一聰技師，清華大學(xué)醫(yī)學(xué)院朱詠林博士(已畢業(yè))、博士研究生劉金陽，北京大學(xué)附屬第三醫(yī)院婦產(chǎn)科助理研究員郭健穎博士等為本研究做出了重要貢獻(xiàn)。清華大學(xué)副教務(wù)長，著名眼科專家黃天蔭教授為本研究提供了寶貴意見。本研究得到國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目、國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目、清華大學(xué)春風(fēng)基金、清華大學(xué)精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)科研計(jì)劃項(xiàng)目、山西醫(yī)科大學(xué)-清華大學(xué)醫(yī)學(xué)院前沿醫(yī)學(xué)協(xié)同創(chuàng)新中心經(jīng)費(fèi)資助。

原文鏈接：http://doi.org/10.1002/advs.202302940